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主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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熒光原位雜交（Fluorescence In Situ Hybridization，F(xiàn)ISH）是在性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法。
FISH技術(shù)具有許多優(yōu)點(diǎn)，如非性、高特異性、高靈敏度、快速簡便、可多重染色等。這些特點(diǎn)使得FISH技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，熒光原位雜交，例如用于研究基因表達(dá)、基因組變異和染色體異常等。
生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子：
基因表達(dá)和調(diào)控研究：原位雜交技術(shù)可以用于研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。例如，可以標(biāo)記特定基因的探針，檢測該基因在不同環(huán)境、不同生長條件下的表達(dá)情況，進(jìn)而研究其表達(dá)調(diào)控機(jī)制。
細(xì)胞分化與發(fā)育研究：在細(xì)胞分化與發(fā)育研究中，原位雜交技術(shù)常被用于檢測和定位特定基因的表達(dá)情況，進(jìn)而了解細(xì)胞分化的過程和機(jī)制。例如，可以標(biāo)記與細(xì)胞分化相關(guān)的基因探針，檢測該基因在不同組織、不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。
DNA 探針為原位雜交提供較高的靈敏度。與RNA探針相比，DNA探針與靶mRNA 分子的雜交強(qiáng)度較弱，因此在雜交后的洗滌中不應(yīng)使用甲醛。
探針特異性至關(guān)重要。如果已知細(xì)胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列，則可據(jù)此設(shè)計(jì)高度的互補(bǔ)探針。如果超過 5% 的堿基對不互補(bǔ)，那么探針只能與靶序列發(fā)生輕度雜交。這意味著，探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去，可能無法正確檢測。
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